HEMATOLOGI III

(METODE PEMERIKSAAN PENEGAKAN DIAGNOSIS ANEMIA)

NAMA            :VALANTINE WAAS

NIM                : 18 3145 353 112

KELAS           : 2018C

PROGRAM STUDI DIV TEKNOLOGI LABORATORIUM MEDIS

FAKULTAS FARMASI, TEKNOLOGI RUMAH SAKIT DAN INFORMATIKA

UNIVERSITAS MEGAREZKY

MAKASSAR

2020

TES DIAGNOSTIK LABORATORIUM

Ø   TES APUSAN DARAH TEPI

Sediaan apus darah (sediaan apus darah tepi / preparat darah) adalah salah satu teknis pemeriksaan sel-sel darah menggunakan mikroskop. Pemeriksaan sediaan darah umumnya digunakan untuk membantu pemeriksaan kelainan darah dan juga infeksi parasit, seperti malaria.

A.    Pra Analitik

1.      Persiapan Pasien : Tidak memerlukan persiapan khusus

2.      Persiapan sampel :

a.       Darah kapiler segar akan memberikan morfologi dan hasil pewarnaan yang optimal pada sediaan apus

b.      Darah EDTA (etilen diamin tetra asetat). EDTA dapat dipakai karena tidak berpengaruh terhadap morfologi eritrosit dan lekosit serta mencegah trombosit bergumpal. Tes sebaiknya dilakukan dalam waktu kurang dari 2 jam. Tiap 1 ul EDTA digunakan untuk 1 ml darah vena

3.      Prinsip test : Prinsip pewarnaan didasarkan pada sifat kimiawi dalam sel. Zat warna yang bersifat asam akan bereaksi dengan komponen sel yang bersifat alkalis, demikian pula sebaliknya. Pewarnaan sediaan apus menggunakan prinsip Romanosky yaitu menggunakan dua zat warna yang berbeda yang terdiri dari Azure B (trimethylthionin)yang bersifat basa dan eosin Y (tetrabromoflourescein) yang bersifat asam seperti yang dianjurkan oleh the International Council for Standardization in Hematology, dan pewarnaan yang dianjurkan adalah Wright-Giemsa dan May GrunwaldGiemsa (MGG).

4.      Alat dan bahan :

a.       Alat :

1)      Kaca Objek 25x75 mm

2)      Batang gelas

3)      Rak kaca objek

4)      Pipet Pasteur

b.      Bahan/reagen :

1)      Metanol absolut dengan kadar air kurang dari 4%, disimpan dalam botol yang tertutup rapat untuk mencegah masuknya uap air dari udara.

2)      Air suling 1 L

Sebagai pengganti larutan dapar, dapat dipakai air suling yang pHnya diatur dengan penambahan tetes demi tetes larutan Kalium bikarbonat 1% atau larutan HCl 1% sampai indikator Brom Thymol Blue ( larutan 0,04 % dalam air suling ) yang ditambahkan mencapai warna biru.

3)      Zat warna Giemsa

Zat warna giemsa 1g

Methanol absolut 10 ml

Hangatkan campuran ini sampai 50°C dan biarkan selama 15 menit, kemudian disaring. Sebelum dipakai, campuran ini diencerkan sebanyak 20 x dengan larutan dapar pH 6,6. Untuk mencari parasit malaria, dianjurkan menggunakan larutan dapar pH 7,2

B.     Analitik

1.      Cara Membuat Sediaan Apus

a.       Dipilih kaca objek yang bertepi rata untuk digunakan sebagai “ kaca peng-apus “ sudut kaca objek yang dipatahkan, menurut garis diagonal untuk dapat menghasilkan sedian apus darah yang tidak mencapai tepi kaca objek

b.      Satu tetes kecil darah diletakkan pada ± 2 –3 mm dari ujung kaca objek.Kaca penghapus diletakkan dengan sudut 30 – 45 derajat terhadap kaca objek didepan tetes darah.

c.       Kaca pengapus ditarik kebelakang sehingga tetes darah , ditunggu sampai darah menyebar pada sudut tersebut.

d.      Dengan gerak yang mantap , kaca penghapus didorong sehingga terbentuk apusan darah sepanjang 3 – 4 cm pada kaca objek. Darah harus habis sebelum kaca penghapus mencapai ujung lain dari kaca objek. Apusan darah tidak bolah terlalu tipis atau terlalu tebal, ketebalan ini dapat diatur dengan mengubah sudut antara kedua kaca objek dan kecepatan menggeser. Makin besar sudut atau makin cepat menggeser, maka makin tipis apusan darah yang dihasilkan.

e.       Apusan darah dibiarkan mengering di udara. Identitas pasien ditulis pada bagian tebal apusan dengan pensil kaca.

Sediaan Yang Baik Mempunyai Ciri – ciri :

1)      Tidak melebar sampai tepi kaca objek, panjangnya setengah sampai dua pertiga panjang kaca

2)      Mempunyai bagian yang cukup tipis untuk diperiksa, pada bagian itu eritrosit terletak berdekatan tanpa bertumpukan.

3)      Rata , tidak berlubang-lubang dan tidak bergaris-garis

4)      Mempunyai penyebaran lekosit yang baik, tidak berhimpun pada pinggir-pinggir atau ujung-ujung sediaan

Ciri-ciri sediaan apus yang baik

2.      Cara Mewarnai Sediaan Apus

a.       Pewarnaan Giemsa

1)      Letakkan sediaan apus pada dua batang gelas di atas bak tempat pewarnaan.

2)      Fiksasi sediaan apus dengan metanol absolut 2 – 3 menit.

3)      Genangi sediaan apus dengan zat warna Giemsa yang baru diencerkan. Larutan Giemsa yang dipakai adalah 5%, diencerkan dulu dengan larutan dapar. Biarkan selama 20 – 30 menit.

4)      Bilas dengan air ledeng, mula-mula dengan aliran lambat kemudian lebih kuat dengan tujuan menghilangkan semua kelebihan zat warna. Letakkan sediaan hapus dalam rak dalam posisi tegak dan biarkan mengering.

3.      Nilai Rujukan :

a.       Evaluasi Eritrosit Yang perlu diperhatikan dalam mengevaluasi eritrosit adalah morfologi, perhatikan :

1)      Ukuran (size) Diameter eritrosit yang normal (normositik) adalah 6 – 8 µm atau kurang lebih sama dengan inti limposit kecil

2)      Bentuk (shape) Bentuknya bikonkaf bundar dimana bagian tepi lebih merah daripada bagian sentralnya

3)      Warna (staining) Bagian sentral lebih pucat disebut akromia sentral yang luasnya antara 1/3 -1/2 kali diameter eritrosit.

C.     Pasca Analitik

1.      Evaluasi Eritrosit Dengan pemeriksaan ini dapat ditemukan berdasarkan morfologi yakni :

a.       Anemia Mikrositik Hipokrom misalnya pada penderita defisiensi Fe.

b.      Anemia Normositik Normokrom misalnya pada pendarahan akut.

c.       Anemia Mikrositik misalnya pada defisiensi Vit. B12 dan asam folat.

2.      Bentuk eritrosit hemolisis : Morfologi secara umum adalah polikromatofilik, makrosit, dansel eritrosit berinti. Bentuk morfologi khusus bervariasi tergantung etiologi kerusakan eritrosit :

a.       Akantosit pada abetalipoproteinemia, sirosis, uremia,Haemolytic Uremic Syndrome (HUS), anemia hemolitik.

b.      Ekinosit pada abetalipoproteinemia, sirosis, uremia HUS,

c.       Sel Target pada Hb C atau E, penyakit hati, ikterus obstruktif, talasemia, pasca splenektomi.

d.      Sel tetes Air Mata pada mielofibrosis, talasemia, anemia hemolitik, mieloftisis.

e.       Sickle Cell pada sickle cell anemia.

f.       Sferosit pada hemolisis didapat maupun herediter.

g.      Ovalosit pada ovalositosis herediter.

h.      Sistosit pada talasemia, anemia hemolitik, mikroangiopati.

3.      Distribusi abnormal eritrosit Rouleaux formation pada multipel mieloma, makroglobulinemia Waldenstorm. Benda-benda inkuilis dalam eritrosit :

a.       Normoblast pada pendarahan akut, hemolisis berat mielofibrosis, asplenia, leukimia, mieloftsis.

b.      Basophilic Stippling anemia sindroma Mielodisplasia.

c.       Howell Jolly Bodies pada anemia megaloblastik, asplenia, hemolisis berat.

d.      Cabot’s, Ring pada hemolisis berat.

e.       Heinz Bodies pada talasemia, anemia hemolitik karena obat, leukemia

4.      Kelainan Eritrosit:

a.       Makrositosis Keadaan dimana diameter rata-rata eritrosit lebih dari 8,5 mikron dengan tebal rata- rata 2,3 mikron. Ditemukan misalnya pada anemi megaloblastik,anemia pada kehamilan dan anemia pada malnutrition. Makrosit dengan bentuk agak oval dengan diameter 12 – 15 mikron disebut megalocyt ditemukan pada anemi deficiency vitamin B 12 dan atau deficiency asam folat.

b.      Mikrositosis Keadaan dimana diameter rata-rata eritrosit kurang dari 7 mikron dan tebal rata-rata 1,5 – 1,6 mikron.

c.       Anisositosis Keadaan dimana ukuran besarnya eritrosit bervariasi, jadi terdapat makro,normo dan mikrosit, sedang bentuknya sama. Ditentukan misalnya pada anemia kronika yang berat.

5.      Variasi Warna Eritrosit

a.       Normokromia Keadaan dimana eritrosit dengan konsentrasi Hb normal.

b.      Hipokromia Kead aan eritrosit dengan konsentrasi kurang dari normal. Bila daerah pucat di central sel melebar,terjadilah “ring erythrocyte” atau anulosit. Ditemukan misalnya pada anemia deficiency besi,thalassemia,hemoglobinopati C atau E.

c.       Hiperkromia Keadaan eritrosit dengan warna oxyphil yang lebih dari normal bukan karena kejenuhan Hb, melainkan karena penebalan membran sel. Ditemukan pada spherocytosis.

d.      Polikromasia Kea daan beberapa warna pada eritrosit misalnya basofilik asidofilik ataupun polikromatofilik.

Ø   TES HITUNG RETIKULOSIT

A.    Pra Analitik

1.      Persiapan pasien

2.      Persiapan sampel

3.      Prinsip :

Darah dicampur dengan larutan, Brilliant Crecyl Blue atau larutan New Methylene Blue, lalu dibuat sediaan. Dan jumlah retikulositnya dihitung dibawah mikroskop. Jumlah retikulosit dihitung per 1000 eritrosit dan dinyatakan dalam %

4.      Alat dan bahan :

a.       Alat :

1)      Tabung reaksi kecil

2)      Kaca obyek dan kaca penggeser

3)      Pipet Pasteur

4)      Penangas air

5)      Mikroskop.

b.      Bahan :

Brilliant Cresyl Blue atau New Methylene Blue (Colour Index 52030) 1g Larutan sitrat salin  100 ml Larutan sitrat salin dibuat dengan mencampur 1 bagian natrium sitrat 30 g/l 4 bagian larutan Na Cl 9,0 g/l.

B.     Analitik

1.      SediaanKering :

a.       Kedalam tabung reaksi kecil teteskan 3 tetes larutan Brilliant Cresyl Blue atau New Methylene Blue.

b.      Tambahkan 3 tetes darah, campurkan baik-baik dan biarkan pada suhu ruangan selama 15 menit agar pewarnaan sempurna. Cara yang lain :Setelah ditambahakan 3 tetes darah, campurkan baik-baik, tabung ditutup dengan parafilm dan diinkubasi pada 37 c selam 30-60 menit.

c.       Setelah inkubasi, tabung dihomogenkan lagi dan ambil 1 tetes untuk membuat sediaan apus. Keringkan di udara dan diperiksa di bawah mikroskop.

d.      Periksalah dengan perbesaran obyektif 100 kali.Dicari daerah yang baik yaitu eritrosit tidak tumpang tindih. Retikulosit tampak sebagai sel yang lebih besar dari eritrosit. Dan mengandung filamen atau granula. Dengan BCB, eritrosit berwarna biru keunguan dengan filamen atau granula berwarna ungu. Bila menggunakan NMB, retikulosit berwarna biru dengan filamen atau granula berwarna biru tua. Hitunglah jumlah retikulosit per 1000 eritrosit dengan lensa emersi

e.       Jumlah retikulosit dapat dinyatakan persen / per mil terhadap jumlah eritrosit total atau dilaporkan dalam jumlah mutlak. Misal : dalam 10 lapangan pandang dijumpai 2000 eritrosit dan retikulosit 76. 100 Jumlah retikulosit (%) : x 76 = 3,8 % atau 2000 1000  x 76 = 38 permil 2000 Bila diketahui jumlah eritrosit 3,5 juta/µl makab38 Jumlah retikulosit = x 3.500.000 /ul = 133.000 / µl 1000

2.      Sediaan Basa :

a.       Taruh 1 tetes larutan BCB ditengah-tengah kaca obyek.

b.       Tambahkan 2 tetes darah dilarutan BCB, homogenkan darah dengan larutan BCB dengan menggunakan sudut kaca obyek.

c.       Tutup dengan kaca penutup

d.      Periksa dengan minyak emersi Cara penghitungan sama dengan sediaan kering  Jika didapatkan jumlah retikulosit yang tinggi atau disertai dengan nilai hematokrit rendah maka dilakukan koreksi terhadap nilai retikulosit. Nilai koreksi ini disebut indeks retikulosit(Reticulocyte Production Indeks)

RP I = % Retikulosit x Hmt penderit x faktor koreksi

 Hmt normal                                                              

Hematokrit Penderita	Faktor Koreksi
40-45 35-40 25-34 15-24 < 15	1,0 1,5 2,0 2,5 3,0

C.     Pasca Analitik

Nilai rujukan = 0,5 – 1,5%

Hitung retikulosit meningkat pada : perdarahan akut, hemolisis,

RP I <2%                 = kegagalan sum-sum tulang membentuk eritrosit.

RP I 2 – 3%             = respons baik terhadap anemia hemolitik

RP I >3%                 = Hiperproliferasi

Sumber kesalahan :

1.      Volume darah yang digunakan tidak sesuai dengan volume zat warna

2.      Zat warna tidak disaring akan mengendap di eritrosit sehingga tampak seperti retikulosit

3.      Waktu inkubasi campuran darah dan zat warna kurang lama

4.      Tidak menghomogenkan campuran zat warna dengan darah sebelum membuat sediaan apus Retikulosit mempunyai berat jenis yang lebih rendah dari eritrosit sehingga berada dibagian atas dari campuran.

5.      Menghitung di daerah yang terlalu padat

6.      Jumlah eritrosit yang dihitung tidak mencapai 1000.

Ø   TES COOMB’S

Coombs test adalah sebuah pengujian atau tes darah yang dilakukan untuk menemukan antibodi tertentu yang menyerang sel-sel darah merah. Antibodi adalah protein yang diproduksi oleh sistem kekebalan tubuh. Biasanya, antibodi mengikat zat-zat asing, seperti bakteri dan virus, untuk kemudian menghancurkannya.

Terdapat dua jenis Coombs test yang umum dilakukan, yaitu:

a)      Tes Coombs langsung (direct) yang melibatkan pemeriksaan langsung pada sel-sel darah merah yang ditemukan dalam sampel darah. Coombs test langsung terkadang disebut juga tes antiglobulin langsung.

b)      Tes Coombs tidak langsung (indirect) dilakukan dengan melakukan pemeriksanaan pada bagian lain dari darah yang disebut dengan plasma darah.

Kedua jenis tes tersebut bertujuan untuk mencari antibodi yang dapat menyerang sel-sel darah merah dan membuatnya hancur.

A.    Pra Analitik  :

1.      Persiapan pasien :

Catat daftar obat yang sedang dikonsumsi pasien. Obat yang dapat mempengaruhi tes ini adalah : penisilin, sefalosporin, antihipertensi dan lain-lain

2.      Persiapan sampel :

Hindari sampel hemolisis, sampel darah dengan antikoagulan natrium sitrat 3,8%. Tes sebaiknya dilakukan selambatnya 2 jam.

3.      Prinsip :

Penambahan serum Coomb‟s (serum hewan yang mengandung antibodi spesifik terhadap globulin manusia) pada eritrosit yang tersensitisasi / eritrosit yang terbungkus dengan imunoglobulin atau komplemen akan menimbulkan suatu aglutinasi.

4.      Alat dan bahan :

a.       Alat :

1)      Tabung reaksi

2)      Pipet tetes

3)      Sentrifus

4)      Inkubator

5)      Kaca obyek dan kaca penggeser

b.      Bahan :

1)      Darah sitrat (1:9)

2)      Larutan NaCl fisiologis (0,9%)

3)      Reagen Coomb‟s

B.     Analitik  :

1.      Sebanyak 0,5 ml darah yang diperiksa dimasukkan ke dalam tabung reaksi

2.      Lakukan pencucian eritrosit 4 kali berturut-turut dengan setiap kali dilakukan sentrifus kemudia plasma dibuang

3.      Buatlah suspensi eritrosit yang tertinggal dalam tabung setelah sentrifus terakhir dengan menambah sekian banyak NaCl fisiologis sampai suspensi eritrosit mempunyai nilai hematokrit 2%

4.      Ke dalam tabung 75 x 10 mm, masukkan 1 tetes suspensi tadi kemudian tambahkan dengan 2 tetes reagen Coomb‟s.

5.      Campur kemudian inkubasikan pada suhu 37OC selama 30-50 menit

6.      Kocok dengan hati-hati tabung tersebut lihat adanya aglutinasi, konfirmasikan dengan menggunakan mikroskop

7.      Jika hasilnya negatif lakukan sentrifus kembali dengan 1000 rpm selama 1 menit

8.      Periksa kembali adanya aglutinasi seperti langkah 6

9.      Bandingkan hasil tes dengan kontrol positif dan kontrol negatif

C.     Pasca Analitik :

-       Terjadi aglutinasi membuktikan adanya antibodi yang melapisi   eritrosit. Tes

-       Coomb‟s positif ditemukan pada : Penyakit hemolitik pada bayi baru lahir Anemia hemolitik autoimun Anemia hemolitik karena obat-obatan Reaksi transfusi hemolitik

Ø   TES ELEKTROFORESIS HEMOGLOBIN

Elektroforesis hemoglobin adalah tes darahyang dapat mendeteksi berbagai jenis hemoglobin . Ia menggunakan prinsip elektroforesis geluntuk memisahkan berbagai jenis hemoglobin dan merupakan jenis elektroforesis gel asli .Tes ini dapat mendeteksi kadar HbS yang abnormal, bentuk yang terkait dengan penyakit sel sabit, serta kelainan darah terkait hemoglobin abnormal lainnya, seperti beta thalassemia dan hemoglobin C.

A.      PraAnalitik

1.      Persiapan Pasien :

a.        Hindari obat yang meningkatkan protein total serum (steroid, androgen, digitalis, insulin, kontrasepsi oral)

b.      Hindari obat yang menurunkan protein total serum (laksansia, rifampisin, dekstran, estrogen)

2.      Persiapan Sampel :

a.       Hindari pemakaian sampel yang ikterik dan lipemik

b.      Hindari hemolisis dan torniquet yang lama : hasilpeningkatan palsu

3.      Prinsip

Pemisahan partikel-partikel dengan muatan listrik yang berbeda, dengan cara mengalirkan arus listrik melalui campuran partikel yang diletakkan pada suatu medium penyangga Molekul bergerak dengan kecepatan yang berbeda-beda kearah elektrode sesuai muatan dan konfigurasinya juga ditentukan oleh sifat media penyangga yang dipakai.

4.      Alat dan bahan :

a.       Alat

1)      Komponen elektroforesis dan power supply

2)      Komponen densitometer

3)      Aplikator

4)      Bak pewarna (untuk proses staining, destaining, dandehydration)

5)      Bak/ kotak kaca (untuk proses clearing)

6)      Oven/hair dryer

b.      Bahan

1)      Sampel serum

2)      Kertas selulosa asetat

3)      Larutan bufer : Tris boric acid EDTA dengan I (Ion streng) 0,03-0,12

4)      Zat pewarna (Ponceau S)

5)      Destaining solutio : asam asetat 5% yang dibuat dari asam asetat glasial 5 ml ditambah akuades 5 ml

6)      Dehidration solutio : etanol 96%

7)      Clearing solutio : campuran 7 bagian volume asam asetat + 3 bagian volume etil asetat

B.     Analitik

1.      Kertas /strip yang dilapisi agarose di rendam pada larutan buffer

2.      Ambil sampel cairan serum dari tabung.

3.      Tuang sampel pada strip berjejer secara melintang

4.      Letakan strip pada bridge secara mendatar & sambungkan dengan alat elektrophoresis,

5.      Pemisahan selesai, kemudian dengan pemulasan protein (Hasil berupa protein staining), dan dilakukan penilaian dengan densitometer yang dihubungkan elektrophoretogram, hasil berupa kurva dan hasil prosentase masing-masing fraksi protein.

C.     Pasca Analitik :

1.      Sampel darah akan diproses oleh mesin. Hasilnya biasanya tersedia setelah 1-2 hari.

a.       Risiko :

Hemoglobin elektroforesis dianggap sebagai prosedur yang aman. Namun, beberapa masalah dapat terjadi dengan memiliki darah diambil, termasuk: pingsan atau perasaan pusing, hematoma (Darah mengumpulkan bawah kulit yang menyebabkan benjolan atau memar), rasa sakit yang terkait dengan beberapa tusukan untuk mencari vena Membantu Anak Anda Memiliki tes darah relatif tanpa rasa sakit. Namun, banyak anak yang takut jarum. Menjelaskan tes dalam hal anak Anda dapat memahami mungkin membantu mengurangi beberapa rasa takut. Biarkan anak Anda untuk meminta teknisi pertanyaan ia mungkin memiliki. Beritahu anak Anda untuk mencoba untuk bersantai dan diam selama prosedur, seperti yang menegangkan otot dan bergerak dapat membuat lebih sulit dan lebih menyakitkan untuk mengambil darah. Hal ini juga dapat membantu anak Anda untuk berpaling ketika jarum yang dimasukkan ke dalam kulit.

2.      Hasil normal pada bayi dan anak-anak Kadar hemoglobin yang normal pada anak-anak, adalah:

Hb F (neonatal)     : 50% – 80%

Hb F (6 bulan)       : 8%

Hb F (>6 bulan)    : 1% – 2%

3.      Hasil normal pada orang dewasa Kadar hemoglobin yang normal pada orang dewasa, adalah:

Hb A                     : 95% – 98%

Hb A2                   : 2% – 3%

Hb F                      : 0.8% – 2%

Hb S                      : 0%

Hb C                     : 0%

Ø   TES FE SERUM DAN TIBC

Total kapasitas pengikatan zat besi ( TIBC ) atau kadang-kadang kapasitas pengikatan zat besi transferrin adalah tes laboratorium medis yang mengukur kapasitas darah untuk mengikat zat besi dengan transferrin.Ini dilakukan dengan mengambil darah dan mengukur jumlah maksimum zat besi yang dapat dibawa, yang secara tidak langsung mengukur transferrin karena transferrin adalah pembawa yang paling dinamis.TIBC lebih murah daripada pengukuran transferrin langsung.

A.    PraAnalitik

1.      PersiapanPasien : Tidakmemerlukan

2.      PersiapanSampel :

a.       HindariHemolisis

b.      Tabungtempatsampelharusbenar-benarbersihdansebaiknyamenggunakantabungbaru.

c.       Apabilatesditunda, sampelsebaiknyadisimpanpadasuhu 4oC (dapatbertahanselama 7 hari) ataudalamsuhuruangan (dapatbertahanselama 3 hari).

3.      AlatdanBahan :

a.       Alat

1)      AutomatikCobas Integra

2)      Pipetvolumetrik 500 µl

3)      tabungmikro.

b.      Bahan

1)      Sampel Serum

2)      Reagensia :

-            R1 : Buffer 8x30 ml dalam 1 L mengandung Sodium asetat 200 mmol, Guanidine hydrokloride 38 % 4,5 mol.

-            R2 : (zatpereduksi) 8 tablet untuk 8x30 ml dalam 1 L mengandung sodium askorbat 16 % 11 mmol, Thiourea 52 % 96 mol.

-            R3 : (Chromogen) dalam 1 L mengandung Sodium asetat 200 mmol, Ferrozine 39 mmol, standar, dalam 1 L mengandungbesi 20 µmol. (112 µg/100 ml).

4.      Prinsiptes

Besiakandilepaskandaritransferinoleh guanidine hisrokloridedanakandireduksimenjadiferroolehasamaskorbat. Bentukbesibivalentersebutdenganfeerozineakanmembentukwarnamerahkompleks. Insensitaswarna yang terjadisesuaidengankosentrasibesidandiukursecarafotometer.

B.     Analitik

1.      Persiapanreagenkerja :

Diambil 1 tablet R2 kemudiandimasukkankedalam 1 vial R1 sampailarutsecaramerata, selanjutnyareagenwarna 1 ml R3 dan 1 tablet R2, kemudianmasukkankedalam 1 vial R1 sampailarutsecaramerata.

2.      Cara Kerja :

a.       Tempatkanreagenkerjapadarakalat

b.      masukkan 500 µl sampelkedalamtabungmikro, letakkanpadaraksampel.

c.       Masukkannomoridentitaspasienlalupilih program tes Fe danpengukuransecaraautomatik.

d.      Hasilteskeluarberupalembar print out.

3.      NilaiRujukan :

Laki-laki : 9,5–29,9 µmol/L (53-167 µg/dl).

Perempuan : 8,8–27,0µmol / L (49-151 µg/dl).

C.     PascaAnalitik

Interpretasi :

-       Kadar besi serum meningkatpada : anemia aplastik, anemia sideroblastik, anemia

-       Hemolitik, eritropoiesis yang tidakefektif(misalnya : anemia pernisiosa, talasemia), hemosiderosisdan hepatitis / kelainanhepar.

-       Kadar besi serum menurunpada : anemia defesiensibesi, penyakitmanahun, kegasan, dll.

Ø   ASPIRASI SUMSUM TULANG

A.    Pra Analitik

1.      Persiapanpasien:

Diberitahukankepadapasienlangkah-langkah  yangakandilakukan, melakukanpemeriksaandarahlengkap, apusandarahtepi, faktorpembekuandarahsepertiprothrombin time, INR, APTT untukmemastikantidakadaresikoperdarahan data prosedurdilakukan.

2.      Persiapansampel: disimpansatuminggupada 40C.

3.      Prinsip:

P4ereaksi asam-basa yang salingberikatanantara  catdenganseldarah, sesuaidengansifat pH darisetiapsel yang terdapatpadasel-seldarahtersebut. Giemsapadadasarnyamerupakangabungandariduamacam cat yaitu methylene blue dan eosin dimana methylene blue bersifatbasaakanberikatandenganbagiansel yang bersifatasamdanmemberikanwarnabirusedangkan eosin yagbersifatasamakanmewarnaibagiansel yang bersifatbasa.

4.      Alatdanbahan

a.       Alat

1)      Objek glass

2)      Pipettetes

3)      Cawan petri

4)      Raktabung

5)      Mikroskop

b.      Bahan

1)      Sampelsumsumtulang

2)      Tabungdarah

3)      Metanol

4)      Giemsa

B.     Analitik

1.      Pembuatanpreparat spread (sebar)

a.       Siapkanalatdanbahan yang akandigunakan

b.      Letakkanobjek glass di cawan petri dengancaradimiringkan

c.       Teteskan 3-4 tetessampelsumsumtulang di atasobjek glass tersebut

d.      Diambilbagianfragmenmenggunakanujungobjek glass yang baru

e.       Buatapusan di atasobjek glass yang lain

f.       Keringkankemudianfiksasidengan methanol selama 5-10 menit

2.      Pembuatanpreparat squash (tekan)

a.       Siapkanalatdanbahan yang akandigunakan

b.      Letakkanobjek glass di cawan petri dengancaradimiringkan

c.       Teteskan 3-4 tetessampelsummsumtulang di atasobjek glass tersebut

d.      Letakkan di atasobjek glass baru

e.       Ratakandantekankemudiangesersecaradatarsampaiujungobjek glass dengancepat

f.       Keringkankemudianfiksasidengan methanol selama 5-10 menit

3.      Pewarnaangiemsa

a.       Genangisediaandenganlarutankerja gie4msa selama 20-30 menit

b.      Sisa cat dibuangkemudiancucidengan air mengalir

c.       Keringkandanperiksa di bawahmikroskop

C.     PascaAnalitik

Normoselluler           : volume lemak 20% dariselhemapoietik

Hyposelluler              : selhemapoietikdigantiolehsellemak

Hyperselluler           : hampirsemualemakdiagantiolehselhemapoietik

Ø   TES KADAR ASAM FOLAT/VITAMIN B12 PLASMA

A.    Pra Analanitik

1.      Persiapan pasien

Pasien tidak dapat menerima suntikan vitamin B-12 intramuskular tiga hari sebelum tes. Meskipun pasien mungkin minum air putih, pasien harus menghindari makanan selama delapan jam sebelum tes. Pasien kemudian bisa makan normal setelah tes.

2.      Persiapan sampel

a.       Untuk orang dewasa :

1)      Pada hari ke 1, buang air kecil ke toilet setelah bangun tidur. Kumpulkan semua urin dalam wadah bersih selama 24 jam berikutnya.

2)      Pada hari ke 2, buang air kecil ke wadah yang sama setelah bangun. Tutup wadah dan beri label dengan nama dan tanggalnya. Simpanlah itu dan simpan di tempat dingin sampai pasien bisa mengembalikannya ke dokter.

b.      Untuk bayi.

1)      Jika petugas perlu mengumpulkan sampel urin 24 jam pada bayi, ikuti langkah - langkah ini:

2)      Cuci daerah sekitar alat kelamin bayi.

3)      Tempatkan tas koleksi urin pada bayi, dan kencangkan pita perekat.

4)      Tempatkan popok pada bayi, tutup tas koleksi.

5)      Periksa bayi secara teratur dan ganti tas setiap kali buang air kecil di dalamnya.

6)      Tiriskan urin ke dalam wadah bersih

7)      Kirimkan kontainer ke dokter segera setelah Anda mengumpulkan jumlah urine yang dibutuhkan.

B.     Analitik

1.      μg radiolabel dari vitamin B12 diberikan secara oral ke pasien puasa.

2.      jam kemudian 1000 μg vitamin B12 yang tidak berlabel diberikan secara intramuskular.

3.      Injeksi imtramuskular keluar sekitar 1/3 dari vitamin B12 radioaktif yang diserap ke dalam urin dengan 24 jam berikutnya.

Ø   TES DARAH RUTIN

A.    Pra Anaitik

1.      Persiapan pasien : Tidak ada persiapan pasien

2.      Persiapan sampe : Darah EDTA 10%

3.      Prinsip :

Impedance berupa larutan elektrolit (dilluent) yang telah dicampur dengan sel-sel darah melalui aperture, hambatan antara kedua elektroda tersebut akan naik sesaat dan terjadi perubahan tegangan yang sangat kecil sesuai dengan nilai tahanannya.

4.      Alat dan bahan : Hematologi analyer, Tabung reaksi, dan Rak tabung

B.     Analitik

1.      Disiapkan alat dan bahan yang akan digunakan.

2.      Dihidupkan UPS, ditekan main power yang terletak pada bagian belakang alat, sehingga lampu indikator main power menyala.

3.      Ditekan tombol power yang terdapat pada bagian depan alat, alat akan secara otomatis melakukan cleaning dan priming.

4.      Ditunggu sampai alat siap digunakan.

5.      Dilakukan pembacaan kontrol.

6.      Dimasukkan data pasien pada computer/display lalu dikirim data tersebut ke alat.

7.      Dipastikan darah tidak menggumpal pada tabung dan dimasukkan sampel pada rak tabung sesuai data pasien yang telah diinput, kemudian tekan tombol start dan akan dilakukan analisa oleh alat.

8.      Hasil akan dikeluarkan dalam bentuk print out.

C.     Pasca Analitik

1.      Eritrosit

Wanita : 4 juta-5 juta/ul darah

Pria : 4,5 juta-5,5 juta/ul darah

2.      Hemoglobin

Wanita : 12-14 g/dl

Pria : 14-16 g/dl

3.      Hematokrit

Wanita  : 38-46%

Pria  : 40-54%

4.      Leukosit : 5 juta-1 juta/ul darah

5.      Trombosit : 150.000-400.0004/ul darah

6.      Laju endap darah

Wanita  : <15

Pria  : <10

7.      Indeks eritrosit

MCH  : 7-31 pg

MCV  : 80-96 fl

MCHC : 32-36 g/dl